Umum

Jenis-jenis kromatografi

Tergantung pada teknologi yang digunakan, sifat pendukung (fase diam) dan zat bergerak (fase gerak), jenis kromatografi berikut dapat dibedakan:

  • Kromatografi kertas. Fase diam dibentuk oleh strip kertas saring. Sampel yang akan dianalisis ditempatkan dalam bentuk setetes pada salah satu ujung kertas. Kemudian potongan kertas tersebut dicelupkan ke dalam wadah tempat fase gerak berada, dengan memperhatikan ujung tempat sampel diletakkan berada di bagian bawah kertas. Fase gerak naik dengan kapilaritas, menyeret sampel dengan itu dan memisahkan setiap komponen sesuai dengan afinitas untuk fase diam. Kromatografi jenis ini digunakan terutama ketika setiap komponen sampel memiliki warna yang berbeda, maka Anda dapat melihat tampilan warna pada kertas untuk mengidentifikasinya.
  • Kromatografi lapis tipis. Pengoperasian teknik ini mirip dengan kromatografi kertas, tetapi dalam hal ini fase diam dibuat dengan mendepositkan resin polar (hampir selalu silika gel) pada pelat kaca atau aluminium. Sejumlah tertentu sampel ditempatkan 1 cm dari tepi bawah piring. Pelat ini kemudian direndam, dengan pertimbangan bahwa ujung yang berisi sampel harus turun, dalam wadah yang berisi fase gerak. Fase gerak naik dengan kapilaritas memisahkan komponen sampel.
  • Kromatografi kolom. Fase diam ditempatkan di dalam kolom yang dapat terbuat dari kaca atau baja tahan karat, di antara bahan lainnya. Fase gerak dapat berupa cair atau gas. Sampel ditempatkan di bagian atas kolom dan dibiarkan turun dengan fase gerak menggunakan gravitasi. Dengan demikian, kromatografi kolom dapat diklasifikasikan sebagai:
    • Kromatografi padat-cair. Fasa diamnya padat dan fasa geraknya cair.
    • Kromatografi cair-cair. Kedua fase itu cair.
    • Kromatografi cair-gas. Fasa diamnya cair dan fasa geraknya gas.
    • Kromatografi gas padat. Fase diam adalah padat dan bergerak adalah gas.

Di sisi lain, dengan mempertimbangkan jenis interaksi analit antara fase diam dan fase gerak, kita memiliki jenis kromatografi berikut:

  • Kromatografi adsorpsi. Pada kromatografi jenis ini fase diamnya adalah padatan, sedangkan fase geraknya adalah cairan. Zat yang membentuk fase diam dapat berupa alumina (Al 2 O 3 ), silika (SiO 2 ) atau resin penukar ion (matriks yang memiliki situs elektrostatik aktif, karena analit dipertahankan di dalamnya oleh interaksi elektrostatik). Fase gerak dapat terdiri dari pelarut atau campuran pelarut. Beberapa komponen campuran akan tertahan dengan kekuatan yang lebih besar dari yang lain, dengan cara ini pemisahan terjadi.
  • Kromatografi partisi. Itu terjadi ketika pemisahan analit dari campuran terjadi karena perbedaan kelarutan atau polaritas antara fase diam dan fase gerak, kedua fase menjadi cairan yang tidak dapat bercampur. Teknologi fase diam telah maju dan sudah ada jenis cairan yang tertanam dalam padatan dan resin yang digunakan untuk tujuan ini. Dalam pengertian ini, ada dua jenis cormatography tergantung pada polaritas fase diam dan fase gerak:
    • Dalam fase biasa. Fase diam bersifat polar dan fase gerak bersifat apolar.
    • Dalam fase terbalik. Fase diam bersifat apolar dan fase gerak bersifat polar.
  • Kromatografi pertukaran ion. Ketika fase diam berbentuk padat dan memiliki gugus fungsi yang dapat terionisasi, yaitu bermuatan, yang mampu bertukar muatan dengan analit. Itu dapat diklasifikasikan menjadi:
    • Kromatografi pertukaran kation. Fase diam mengandung gugus fungsi yang bermuatan negatif, sehingga menahan kation (bermuatan positif).
    • Kromatografi pertukaran anion. Fase diam mengandung gugus fungsi bermuatan positif, sehingga menahan anion (bermuatan negatif).
  • Kromatografi pengecualian ukuran. Fase diam adalah bahan berpori yang melaluinya analit terelusi, tergantung pada ukurannya. Dalam jenis kromatografi ini tidak ada jenis interaksi fisik atau kimia antara analit dan fase diam. Analit yang lebih besar terelusi terlebih dahulu, yaitu, mereka tidak dipertahankan dalam fase diam. Sedangkan analit yang lebih kecil terperangkap dalam pori-pori fase diam dan meninggalkannya saat fase gerak (cair) lewat.

Dengan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi, teknik kromatografi telah disempurnakan dan zat-zat yang ada dalam campuran semakin dipisahkan, diidentifikasi dan dikuantifikasi dengan lebih akurat. Dua contoh kromatografi tingkat lanjut adalah HPLC (Kromatografi Cair Kinerja Tinggi) dan GC (Kromatografi Gas).

  • HPLC. Ini terdiri dari jenis kromatografi kolom, tetapi fase geraknya dipompa pada tekanan tinggi melalui fase diam di dalam kolom. Penerapan tekanan tinggi mengurangi difusi analit melalui fase diam, sehingga mencapai hasil yang lebih baik, selain mengurangi waktu kerja.
  • GC. Fase gerak adalah gas dan fase diam dapat berupa padatan atau cairan. Sampel menguap sebelum disuntikkan ke dalam kolom kromatografi, karena harus berupa gas agar gas pembawa dapat mengangkutnya.